Tet-On基因表达系统定量调节荧光素酶基因在CHO细胞中的表达

摘要：

目的:应用Tet-On基因表达系统建立CHO-Tet-On细胞株,通过强力霉素(Dox)调节荧光素酶基因的表达.方法:pTet-On质粒转染CHO细胞株,经 G418筛选,得到稳定表达株CHO-Tet-On.pTRE-Luc质粒瞬时转染CHO-Tet-On 克隆1至30,培养基中加入2 mg*L-1 Dox或不加Dox,培养72 h后检测荧光素酶活性.结果:克隆18、28、29当培养基中加入Dox(即"On"状态)时荧光素酶活性高,当培养基中不加Dox(即"Off"状态)时荧光素酶活性低,故选择克隆18、28、29作为高表达、低背景的CHO-Tet-On细胞株.结论:CHO-Tet-On细胞株的建立,可利用四环素及其衍生物调节多种外源基因的表达,有效调控基因表达的时间和水平,定量诱导毒性蛋白的表达,增加治疗的疗效和安全性,有望为基因治疗提供一条可控的安全途径.

关键词：Tet-On基因、基因表达调控、荧光素酶基因、CHO细胞

所属期刊栏目：30

分类号：Q343.11(遗传学分支学科)

资助基金：科技部专项基金96-906-01-19

在线出版日期：2006-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：512-514