Nrf2对C2C12细胞肌浆网钙调节的影响及机制

摘要：

目的:Nrf2是调节机体内氧化应激的重要的核转录因子,本研究探讨Nrf2在小鼠成肌细胞系C2C12细胞中[Ca2+]i调节中的作用及其机制.方法:体外培养C2C12细胞,分别采用Nrf2的激动剂tBHQ和抑制剂Brusatol干预,将细胞分为空白对照组(Control,C组)、激动剂组(Stimulants,S组)和抑制剂组(Inhibitors,Ⅰ组).荧光比色法检测C2C12细胞ROS水平;采用Fluo-4 AM钙离子染料负载,激光扫描共聚焦显微镜检测C2C12细胞[Ca2+]i变化;Western blot方法检测C2C12细胞肌浆网钙调节蛋白RyR、FK-BP12、CaM、PKA、CaMKⅡ、SERCA1和SERCA2的蛋白表达.结果:1)与C组相比,Ⅰ组C2C12细胞ROS水平显著增加(P＜0.01);2)在H2O2氧化应激刺激下,与C组相比,Ⅰ组C2C12细胞[Ca2+]i在185.4 s后非常显著增加(P＜0.01),而S组[Ca2+]i在61.8 s后显著降低(P＜0.01);3)与C组相比,Ⅰ组Nrf2蛋白表达显著降低(P＜0.05),S组无显著性差异;4)与C组相比,肌浆网钙调节蛋白RyR、FKBP12、PKA显著增加(P＜0.05),SERCA1和SERCA2蛋白显著降低(P＜0.05),而S组蛋白表达无显著变化.结论:1)Nrf2在H2O2介导的C2C12细胞[Ca2+]i异常增加过程中起保护作用;2)Nrf2被抑制后可引起C2C12细胞RyR、PKA蛋白表达增加,从而增强肌浆网钙释放功能;同时引起C2C12细胞SERCA蛋白表达减少,使肌浆网钙回收功能减弱.

关键词：Nrf2、C2C12细胞、[Ca2+]i、肌浆网、钙调控

所属期刊栏目：41

分类号：G804.7(体育理论)

资助基金：国家自然科学基金31471134

在线出版日期：2018-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：60-67