基于DNA条形码的桑黄真菌分子鉴定

摘要：

DNA条形码(DNA barcoding)技术是一种利用生物基因组内短遗传标签进行分类鉴定的方法.桑黄自古以来是一种名贵中药材,而市售桑黄主要依托简单的形态鉴定造成混淆众多.近年来大量研究表明,桑黄类真菌种类至少有7个种,并且其药效也不尽相同.[目的]为更准确、高效对桑黄类真菌进行鉴定,本研究以采集自西藏、吉林和浙江的3种桑黄子实体为材料,筛选最佳DNA条形码与相应PCR条件.[方法]利用组织分离获得3种桑黄纯培养菌株,分别编号为1713、1714和HS菌株.利用ITS、NL、rpb1、rpb2和ef1-α等7组DNA条形码分别对3种桑黄进行PCR扩增、测序、比对和发育树分析,并结合形态学特征,确定其最适DNA条形码和分类学地位.[结果]结果表明,ITS和NL条形码对3种桑黄均能够获得单一目的条带;rpb1Y、rpb2B和rpb2Y条形码特异性低,扩增后获得多个条带;而rpb1B和ef1-α条形码均无法获得条带.通过多序列比对,结合形态分析,确定1713菌株为桑黄纤孔菌(Inonotus sanghuang),而1714和HS菌株均为鲍姆纤孔菌(Inonotus baumii).[结论]本研究确定ITS和NL为桑黄分子鉴定的最佳DNA条形码,其PCR最适退火温度范围分别为58～59℃和49～50℃,为桑黄真菌快速鉴定提供参考依据.

关键词：桑黄、分子鉴定、DNA条形码、NL、ITS

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分类号：Q939.5(微生物学)

资助基金：北京市自然科学基金项目5162006;北京市科技新星计划项目xx2015B025;北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目2018YJS034

在线出版日期：2019-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：20-27