猪瘟疫苗病毒荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

[目的]建立一种检测猪瘟疫苗病毒(HCLV)含量的荧光定量PCR方法.[方法]用RT-PCR方法扩增HCLV基因200 bp片段,构建含有该基因片段的重组质粒,对此重组质粒进行系列稀释后作为SYBR GreenⅠ荧光定量PCR模板,绘制定量检测HCLV的标准曲线.[结果]在(6.4×107～6.4×102) copies/μL模板浓度范围内,荧光定量PCR的扩增效率为92.2％,标准曲线的决定系数为o.9997.该方法的精确灵敏度为640copies/μL,重复性试验的变异系数小于2％,对牛病毒性腹泻病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等的检测结果均为阴性.临床检测结果显示,不同商品猪瘟疫苗之间的病毒载量存在明显差异.[结论]建立了1种具有良好特异性与敏感性的HCLV荧光定量PCR检测方法.

关键词：猪瘟疫苗病毒、荧光定量PCR、定量检测

所属期刊栏目：32

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

资助基金：北京市农委“菜篮子”能力提升工程项目20150203-13

在线出版日期：2017-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：85-88