牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶K催化结构域融合蛋白的纯化及其多克隆抗体的制备

摘要：

目的 纯化牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶K催化结构域(KGPcd)融合蛋白并制备其多克隆抗体,为下一步的实验提供条件.方法 KGPcd蛋白与载体pET-16b中的His标签融合表达,用Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白,复性后用Western blot检测.以重组、纯化的KGPcd蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,用间接ELASA法检测抗体效价,Western Blot进行抗血清特异性试验.结果 经亲和层析、复性得到纯化融合蛋白His-KGPcd,Western blot进一步证实纯化的蛋白为His-KGPcd融合蛋白.抗血清稀释达1:3200时,ELASA法仍有明显的抗原抗体反应,Westem blot也进一步证实抗血清能够与KGPcd发生特异性反应,抗体仪特异识别目的 蛋白.结论 成功制备兔抗KGPcd多克隆抗体,为后续研究奠定基础.

关键词：牙龈卟啉单胞菌、牙龈蛋白酶K、融合蛋白、Ni-NTA、多克隆抗体

所属期刊栏目：19

分类号：R392.11

在线出版日期：2011-10-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：202-205