通过T-A克隆技术构建含免疫刺激序列CpG基序的抗SBR DNA疫苗

摘要：

目的:构建含免疫刺激序列、能够阻止变形链球菌在牙面粘附的防龋DNA疫苗.方法:根据原核表达质粒pSBR-CTA2B基因序列,设计针对编码变形链球菌表面蛋白抗原AgⅠ/Ⅱ分子中唾液蛋白结合区段(SBR)的特异性PCR引物,利用PCR技术由质粒pSBR-CTA2B扩增目的DNA片断;通过T-A克隆技术将目的DNA片段克隆于中间载体pMD18-T,鉴定插入方向后,选择插入方向正确的克隆,将目的DNA从中间载体释放,再克隆至含有CpG免疫刺激序列的真核表达载体pcDNA3.1.结果:通过对重组质粒pcDNA3.1-SBR进行酶切图谱分析和DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pcDNA3.1-SBR构建成功、开放阅读框架正确.结论:利用T-A克隆等技术可成功将编码SBR的DNA片段克隆到含有免疫刺激序列CpG的真核表达载体pcDNA3.1的适当部位,构建出真核表达重组质粒pcDNA 3.1-SBR作为有效防龋的DNA疫苗.

关键词：龋病预防、DNA疫苗、CpG基序、T-A克隆

所属期刊栏目：10

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30171010

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：109-113