双酶法制备L-天冬氨酸的循环生产工艺
目前,工业上采用化学法将马来酸转化为富马酸,然后用L-天冬氨酸裂解酶菌株全细胞催化富马酸和氨水生产L-天冬氨酸,并采用硫酸酸化方法使L-天冬氨酸结晶.两步催化反应步骤繁琐,并且全细胞催化富马酸为L-天冬氨酸的菌体消耗量大,硫酸结晶法会产生废品硫酸铵.为了克服以上不足,将两步反应合并,利用实验室构建的马来酸异构酶和L-天冬氨酸裂解酶共表达的大肠杆菌(Escherichia coli BL21(DE3)Bptm-Easp)细胞裂解液催化马来酸铵生产L-天冬氨酸;对酶催化反应条件进行了优化,得到最佳条件:采用pH8.0的200 g/L马来酸铵溶液作为底物,加入马来酸异构酶总活力为2000 U/L的E.coli BL21(DE3)Bptm-Easp细胞裂解液,于40℃反应24 h,马来酸可转化完毕;反应液经活性炭脱色后,采用马来酸代替硫酸使L-天冬氨酸结晶,经洗涤、干燥后得到L-天冬氨酸晶体,结晶收率达到81.80％;采用碳酸氢铵和少量氨水中和结晶后的马来酸滤液,作为下一批次反应的底物溶液;在此基础上进行了4批次马来酸滤液转化反应,马来酸转化率均在99％以上,L-天冬氨酸结晶收率均在80％以上,L-天冬氨酸纯度达到98％以上.
L-天冬氨酸、马来酸异构酶、L-天冬氨酸裂解酶、碳酸氢铵、循环生产工艺
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Q819(生物工程学(生物技术))
2023-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
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