一种嗜酸普鲁兰芽孢杆菌普鲁兰酶基因在大肠杆菌中的诱导表达与活性表征

摘要：

从嗜酸普鲁兰芽孢杆菌基因组中扩增出普鲁兰酶基因PulA,并将该基因连接到大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建了普鲁兰酶基因的诱导表达载体pET-28a-PulA.测序结果表明,普鲁兰酶基因PulA长度为2766 bp,编码922个氨基酸.将重组载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)后,普鲁兰酶基因PulA在IPTG诱导下获得表达,产生胞内蛋白.SDS-PAGE测定的分子量约为110 kD.细胞超声破碎液酶活为0.45 U/mL.该酶的最适温度为55℃,最适pH为5.0,金属离子对酶活性影响不显著,具有Ⅰ型普鲁兰酶特性.此重组普鲁兰酶的酶学性质表明此酶具有独特的耐酸性质,具备一定的工业化应用价值.

关键词：普鲁兰酶、基因克隆、基因表达

所属期刊栏目：42

分类号：Q819(生物工程学(生物技术))

资助基金：北京市青年英才计划YETP1450

在线出版日期：2015-10-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：82-86