小球藻Chlorella variabilis NC64A二酰甘油酰基转移酶基因的克隆表达与功能研究
为了揭示二酰甘油酰基转移酶(DGAT)在小球藻油脂合成过程中的作用,对单细胞小球藻Chlorella variabilis NC64A的二酰甘油酰基转移酶进行原核克隆表达及功能初步研究.结果表明,其编码序列为894bp,编码297个氨基酸,表达蛋白的表观分子量为33 kDa,pI 9.48.保守结构域分析表明,该蛋白属于Lysophospholipid acyltransferases (LPLATs)超家族,具有二酰甘油酰基转移酶活性,序列位点H68,L71,F76,R94,I97和GAA (144-146)组成特定的酰基受体结合口袋,能够结合酰基-酰基载体蛋白(ACP)或者酰基辅酶A上的酰基,催化三酰甘油合成的最后一步.表达蛋白与SsPDAT和AtPDAT的序列相似性分别为32％和24％,表明该蛋白可能具有磷脂酰甘油酰基转移酶(PDAT)活性,能利用磷脂上的酰基合成三酰甘油.因此,采用薄层层析方法以L-α-磷脂酰胆碱和1,2-二油酰-srn-甘油为底物,检测到其确实具有PDAT活性,表明限氮条件下NC64A中DGAT的PDAT活性可能促进了膜脂降解耦合三酰甘油的合成.
Chlorella variabilis、三酰甘油、二酰甘油酰基转移酶、磷脂酰甘油酰基转移酶、克隆表达
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Q786(基因工程（遗传工程）)
863计划2013AA065802;农业生物技术国家重点实验室2014年开放课题2014SKLAB06
2017-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
187-192
