板栗SSR标记研究中聚丙烯酰胺凝胶银染显影体系的优化

摘要：

为筛选出高效、稳定的银染显影体系,以板栗叶片DNA为扩增模板,利用L16 (45)正交实验设计的方法,研究了AgNO3使用量、CH2O使用量、Na2CO3使用量及上样量4个主要因素对聚丙烯酰胺凝胶银染显影的影响,并对优化出的方法在银染效果、试剂使用和显影时耗等方面进行分析.结果 表明:在碱性条件下,0.1％ AgNOs+1 mL CH2O+0.2 9 Na2CO3(500mL体系)+1.5μL上样量的银染显影效果最佳.筛选出的体系能有效克服胶图分辨率低、背景暗,读带不清晰和危险试剂消耗大的问题,为批量试验、快速读带提供了支持.

关键词：聚丙烯酰胺凝胶、板栗、正交实验、银染显影效果

分类号：S664.201(果树园艺)

资助基金：河北科技计划专项资助项目162268230;北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划资助项目IDHT20180509;北京市自然科学基金重点B类资助项目KZ201710020012

在线出版日期：2019-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：27-33