桃PpSnRK1βλ1基因的克隆及在拟南芥中异源转基因的功能分析

摘要：

以实生毛桃为试材,采用PCR和实时荧光定量技术,克隆桃树SnRK1蛋白激酶(蔗糖非发酵-1-型相关蛋白激酶-1)的调节亚基βλ,并分析其组织表达特性.构建p35S::P pSnRK1βγ1重组载体,获得超表达PpSnRK1βλ1基因拟南芥植株用于分析其生物功能.结果表明:克隆获得桃树SnRK1βλ1,命名为PpSnRK1βλ1.该cDNA全长为1 476 bp,编码492个氨基酸.序列分析表明,其包含CBM和4个CBS结构域;PpSnRK1βλ1与果梅的SnRK1βλ蛋白亲缘关系最近;PpSnRK1βλ1基因在实生毛桃的根、茎、叶均有表达,其中在茎中表达量最低.超表达PpSnRK1βγ1基因拟南芥株系A-βγ1的花期比野生型晚2.19 d,单株莲座叶数量比野生型多1.17片;叶片的叶绿素、可溶性糖和可溶性蛋白质含量均显著高于野生型拟南芥,分别比野生型提高了13.7％、12.9％和23.3％,但淀粉含量却没有显著性差异.在氧化胁迫条件下,转基因植株与野生型的生长均受到抑制,但前者具有更好的萌发率和主根长度,以保证植株正常生长.因此,PpSnRK1βλ1基因参与调控植株的碳氮代谢,并影响植物的花期,以及在防御氧化胁迫过程中起重要作用.

关键词：桃树、PpSnRK1βλ1、基因克隆、表达分析、功能研究

分类号：S662.103.6(果树园艺)

资助基金：国家现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目CARS-31

在线出版日期：2017-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：98-106