黄瓜绿斑驳花叶病毒核酸试纸条检测技术的建立

摘要：

以黄瓜绿斑驳花叶病毒(cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)阳性样品为研究对象,根据其外壳蛋白基因设计3条引物和2条探针,探针5'端分别用生物素和荧光进行标记;利用这套引物和探针在59℃进行RT-PCR恒温扩增90 min,扩增产物用核酸试纸条进行检测.用其它5种同样侵染葫芦科作物的植物病毒作为对照进行试验,以期确定试纸条检测方法的特异性.将梯度稀释后的总RNA作为模板进行检测,以确定该方法的灵敏度.结果表明:该试验建立的核酸试纸条检测方法对CGMMV具有特异性,能够有效区分CGMMV及同样侵染葫芦科作物的黄瓜花叶病毒(CMV)、辣椒轻斑驳病毒(PMMoV)、烟草花叶病毒(TMV)、番茄花叶病毒(ToMV)和小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV);同时该方法也具有较高的灵敏度,可检测低至24.300 ng·μL-1的总RNA.因此该试验建立的核酸试纸条法可用于CGMMV的快速检测.

关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒、核酸试纸条、检测

分类号：S431.9(病虫害及其防治)

资助基金：国家“十二五”科技支撑计划资助项目2015BAD08B01;国家“十三五”重点研发计划资助项目2016YFF0203203

在线出版日期：2017-07-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：100-103