蒙古沙冬青AmDREB2.1表达载体构建及其结合活性鉴定

摘要：

以蒙古沙冬青为试材,以AmDREB 2.1为研究对象,采用构建植物表达载体和叶盘法进行了AmDREB2.1转烟草研究,采用Gateway和酵母单杂交技术研究了AmDREB2.1转录因子的结合活性.结果表明:以BamH Ⅰ和Sac Ⅰ酶切位点成功构建了pPZP212-AmDREB2.1表达载体,通过叶盘法获得了T0转AmDREB2.1烟草株系.成功构建了pDEST22-AmDREB 2.1的酵母单杂交栽体,分别转化YH4271-mDRE和YH4271-wDRE 2种酵母菌株,在Trp HisAde三缺培养基(3-AT浓度为0、20 mmol· L-1)上筛选获得了阳性克隆,检测其β-半乳糖苷酶活性为阳性,显示AmDREB2.1具有转录因子的结合活性.

关键词：蒙古沙冬青、AmDREB2.1、植物表达载体、酵母单杂交载体、结合活性

分类号：S792.189(森林树种)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31370356;中央民族大学一流大学一流学科资助项目YLDX01013,2015MDTD08C.

在线出版日期：2017-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：95-100