两种独行菜种子cDNA-SRAP反应体系的建立及优化

摘要：

以2种独行菜种子为试材,采用cDNA-SRAP技术,研究了dNTPs、Mg2+、上下游引物、cDNA模板、Taq DNA聚合酶浓度等5个因素对独行菜cDNA-SRAP反应体系扩增结果的影响,以期得到适合2种独行菜种子的cDNA-SRAP反应体系,并且对cDNA-SRAP扩增条件进行了优化.结果表明:优化的最佳cDNA-SRAP反应体系(20 μL)为10×PCR buffer,cDNA模板用量100 ng,Mg2+浓度1.75 mmol·L-1,dNTPs浓度o.275 mmol·L-1,引物浓度1.0 μnol·L-1,TaqDNA聚合酶用量0.5U;利用优化的cDNA-SRAP反应体系能够扩增获得清晰、数目多的条带,可用于后续深入研究2种独行菜不同处理下差异表达基因.

关键词：独行菜、cDNA-SRAP、单因素试验、正交实验设计

分类号：S636.903.6(蔬菜园艺)

资助基金：新疆维吾尔自治区重大科技专项科技支疆资助项目200840102-40;国家自然科学基金资助项目31160051/C020407.

在线出版日期：2017-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：99-103