苦瓜谷氨酰胺合成酶基因(McGS1)原核表达载体的构建及表达分析

摘要：

以"热研3号"苦瓜为试材,根据苦瓜谷氨酰胺合成酶基因(McGS1)全长序列信息设计引物,提取"热研3号"苦瓜总RNA并反转录成cDNA作为模板,通过PCR扩增、产物测序、酶切等方法与pET-30a(+)原核表达载体相连,构建苦瓜McGS1基因原核表达载体,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达分析,研究不同IPTG浓度及诱导时间对苦瓜McGS1基因蛋白在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达的影响.结果表明:该研究成功构建了苦瓜McGS1基因的原核表达栽体,37℃、0.2 μmol/L IPTG诱导4h苦瓜McGS1基因蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中可高效表达,表达的蛋白质分子量约为35 kDa.

关键词：苦瓜、谷氨酰胺合成酶、原核表达

分类号：S642.503.6

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目1630032013007,1630032015015.

在线出版日期：2015-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：110-113