杜鹃花ISSR-PCR反应体系的建立和优化

摘要：

以杜鹃花为试验材料,采用正交实验方法,研究模板DNA浓度、ISSR引物浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、Mg2+浓度等5个因素对ISSR-PCR反应体系的影响,以建立适合杜鹃花的ISSR-PCR最佳扩增体系.结果表明:杜鹃花ISSR反应体系的最佳条件为模板DNA用量为60 ng/20μL,ISSR引物浓度0.60 μmol/L,dNTPs浓度0.50 μmol/L,Taq DNA聚合酶浓度30 U/mL,Mg2+浓度为0.6 mmol/L.采用该反应体系可以从10份杜鹃花(R.simsii)基因组内扩增出稳定性高、重复性好ISSR-PCR产物.该研究为杜鹃花的遗传多样性分析、ISSR指纹图谱构建、亲缘关系鉴定等研究奠定了基础.

关键词：杜鹃花、ISSR-PCR、引物筛选、正交优化

分类号：S685.21(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：黄冈师范学院博士启动基金资助项目2013030903;经济林木种质改良与资源综合利用湖北省重点实验室开放基金资助项目2013000403.

在线出版日期：2015-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：111-114