高通量提取桃树叶片组织基因组DNA的研究

摘要：

以1个桃树杂交后代群体中不同成熟度的桃叶片组织为试材,以商品试剂盒为对照,采用高通量提取DNA的方法,研究了提取试剂、研磨仪使用钢珠大小和震动频率、时间等参数对提取DNA产物产率、质量的影响.结果表明:在常用的CTAB中添加0.3％的抗坏血酸,并提高PVP浓度至4％,NaC1浓度至12％,能有效解决试剂盒提取过程中出现色素及蛋白质、多糖等杂质问题.提取方法和研磨方法优化组合,筛选获得高通量提取不同成熟度桃叶片DNA的方法,表明改良的提取方法采用5mm研磨珠、60s、30次/s或5mm研磨珠、60s、25次/s的研磨预处理,不仅省时省工,适用不同成熟度的桃叶片组织,而且提取效果最好,产率最高,质量符合基因组测序要求.该研究为高效提取DNA提供了技术依据.

关键词：桃树、叶片、高通量、基因组DNA

分类号：S662.103.6(果树园艺)

资助基金：国家“863”资助项目2011AA1002060001;国家园艺实验教学示范中心建设资助项目I105021301.

在线出版日期：2015-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：120-125