栓皮栎ISSR反应体系的建立

摘要：

以栓皮栎叶片为试材,采用单因素试验设计对栓皮栎ISSR反应条件进行系统优化,建立了栓皮栎ISSR的最佳反应体系和扩增程序.结果表明:PCR反应体系总体积为25μL,其中10×Buffer 2.5μL,30 ng模板DNA,1.5 UTaq聚合酶,2.5 mmol/L Mg2+,0.6 μmol/L引物,0.3 mmol/L dNTPs;扩增程序:94℃预变性1min;94℃变性30 s,51.5～59.0℃退火60 s,72℃延伸2 min,35个循环;最后72℃延伸5 min.在此条件下从100条ISSR引物中筛选出12条多态性好、稳定性高的引物对陕西省天然群体共22个栓皮栎个体的DNA进行扩增,共得到166个位点,其中142个为多态位点,多态位点百分率为85.54％,Nei指数为0.2928,Shannon信息指数为0.4381,表明栓皮栎的遗传多样性处于较高水平.

关键词：栓皮栎、ISSR、体系优化、遗传多样性

分类号：S792.189(森林树种)

资助基金：林业公益性行业专项资助项目21004011;西北农林科技大学唐仲英育种基金资助项目.

在线出版日期：2015-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：93-97