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通过RACE技术构建铁皮石斛叶mRNA的cDNA PCR文库

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基于RACE技术,以铁皮石斛叶片总RNA为起始材料,通过逆转录和末端转移构建出两端含有特定序列的cDNA.然后以连接有特定序列的引物进行cDNA的PCR扩增,从而构建出mRNA的cDNA PCR文库.结果表明:cDNA PCR文库的PCR效果明显高于逆转录产物的PCR效果,该方法构建的cDNA PCR文库能使cDNA放大100倍以上;以5 pg的总RNA为起始材料构建cDNA PCR文库仍可得到良好的PCR扩增效果;该研究的cDNA PCR文库构建方法费用较低,操作简单,为克隆微量表达的基因提供了技术基础.

cDNA PCR文库、RACE、逆转录、PCR

R931.71(生药学(天然药物学))

国家自然科学基金资助项目31271302.

2014-09-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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