正交设计对'红阳'猕猴桃ISSR反应体系的优化研究

摘要：

以'红阳'猕猴桃及其杂交F1代为试材,通过正交设计对ISSR-PCR扩增反应的影响因子进行优化,初步确立了适合'红阳'猕猴桃ISSR-PCR反应体系:总体积20 μL,10×PCR buffer 2.0 μL,Mg2+ 0.75 mmol/L, Taq酶1.5 U,模板DNA 60 ng,引物1.25 μmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L.扩增程序:94℃预变性7 min,94℃变性30 s,50～58℃退火45 s,72℃延伸2 min,45个循环,72℃延伸7 min.引物UBC841的最佳退火温度为58.5℃.应用该优化反应体系,用UBC835对35份杂交F1代DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示优化后的反应体系具有较高的稳定性.

关键词：’红阳’猕猴桃、正交设计、ISSR、反应体系

分类号：S663.4(果树园艺)

资助基金：国际科技合作资助项目2009DFA30870;四川省"十一五"攻关资助项目04FB013-016

在线出版日期：2010-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：125-128