杏树皮可溶性总蛋白的提取与浓缩方法探讨

摘要：

为从杏树皮组织中获取高质量的可溶性总蛋白,选择经过冬季自然低温驯化的1 a生杏树新梢为试材,比较分析提取缓冲液中分别添加2%SDS,不同浓度的Tween 20,以及高浓度PVPP对可溶性总蛋白提取浓度和质量的影响.结果表明:提取杏树皮可溶性总蛋白的最佳缓冲液体系为:5 mL 50 mmol/L的Tris-HCl缓冲液(其中含2 mM EDTA-Na2,10 mmol/L抗坏血酸,0.5 mmol/L DTT,0.1 mmol/L PMSF,1%(w/v)PVPP,pH 8.0)和0.5% Tween20.丙酮浓缩方法中加入蛋白粗提液2倍体积的冷丙酮是最理想的.经过提取和浓缩的蛋白浓度可达0.773 μg/μL,电泳分析中的条带多而清晰,可用于后续的目的蛋白纯化试验及功能分析.

关键词：杏、树皮、可溶性总蛋白、提取

分类号：Q946-33(植物学)

资助基金：北京市优秀人才培养D类资助项目20061D0200500047

在线出版日期：2010-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：51-53