探讨穿心莲内酯对HIV-1感染辅助受体CXCR4启动子作用机制的研究

摘要：

穿心莲内酯具有明显的抗病毒作用,对HIV-1(Human immunodeficiency virus type 1)具有明显的抑制作用,本研究探讨了穿心莲内酯影响CXCR4启动子活性的作用机制.首先构建双荧光素酶报告基因载体pFireRluc-CXCR4(C-X-C chemokine receptor 4),并转染入人HEK293T细胞;利用CCK8法检测穿心莲内酯对人HEK293T细胞细胞毒性作用;双荧光素酶报告基因技术检测穿心莲内酯对CXCR4启动子活性的影响;MTT法检测穿心莲内酯对人T淋巴细胞Jurkat细胞活性影响;实时荧光定量PCR检测穿心莲内酯对人T淋巴细胞Jurkat细胞表面CXCR4 mRNA和蛋白表达的影响.PCR分别扩增了 CXCR4启动子(777 bp)和Rluc(1 997 bp)表达单元,通过测序和酶切鉴定双荧光素酶报告基因载体插入正确;穿心莲内酯作用于转染pFireRluc-CXCR4HEK293T细胞,双荧光素酶结果显示:穿心莲内酯能够下调CXCR4启动子活性,差异具有显著性(P＜0.05).穿心莲内酯作用于人T淋巴细胞Jurkat细胞后,qPCR和Western Blot结果显示:Jurkat细胞表面CXCR4 mRNA和蛋白表达降低.因此,穿心莲内酯能够影响CXCR4启动子活性,具有潜在的抗HIV-1的作用.

关键词：穿心莲内酯、CXCR4、启动子、HIV-1

所属期刊栏目：38

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金;河南省青年骨干教师资助项目;河南省高校重点科研项目

在线出版日期：2022-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：363-370