10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003947
LAT基因簇miRNA的CRISPR/Cas9基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响分析
病毒编码的microRNA(miRNA)在马立克病病毒(MDV)的复制、潜伏感染及诱导肿瘤发生中发挥重要的调控功能.血清1型MDV(MDV-1)编码的26个成熟体miRNA在基因组中形成3个基因簇,分别命名为Meq、Mid和LAT miRNA基因簇.本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以超强毒株(vvMDV)国内代表株GX0101为研究对象,设计并合成一系列可实现LAT基因簇miRNA编辑缺失的特异性gRNA组合,成功构建了一株LAT基因簇miRNA缺失毒株GX△LAT-miRs-C21-15.经DNA测序分析、IFA鉴定及RT-qPCR分析,证实LAT基因簇miRNA被完全编辑缺失.该基因缺失毒株传代稳定性良好,miRNA的缺失不影响MDV的体外复制及相关基因表达.本研究基于CRISPR/Cas9系统,获得了稳定的LAT基因簇miRNA编辑缺失毒株,为后续相关miRNA的功能研究奠定了重要基础.
MDV;CRISPR/Cas9;基因编辑;miRNAs;LAT基因簇;调控功能
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S852.65;S855(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金;中原英才计划;河南省自然科学基金;河南省重点研发与推广专项项目;青年科技基金
2021-12-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共12页
1428-1439