携带高滴度猪瘟病毒C株猪睾丸细胞株的建立及蛋白质组学分析

摘要：

猪睾丸细胞(Swine testicular,ST)广泛用于猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的传代,为了进一步提高ST细胞增殖的CSFV滴度,我们利用有限稀释法克隆出一种稳定携带高滴度CSFVC株的单克隆细胞株(STC).间接免疫荧光实验结果显示,几乎100％STC细胞携带CSFV抗原;且STC细胞中CSFV滴度为106 TCID50/mL,与CSFV单次感染亲本ST细胞的病毒滴度104 TCID50/mL相比,具有更高的病毒产量.为了探究STC细胞持续带毒后细胞内蛋白表达水平的变化,我们通过非标记定量蛋白质组学分析发现541种蛋白表达水平发生明显变化,并选取其中差异显著且与病毒复制或细胞存活相关的两种上调蛋白(GRP94,GRP78)、两种下调蛋白(β-catenin,ISG15)进行免疫印迹验证.本试验成功获得了可以稳定携带高滴度CSFV C株的STC细胞株,并初步筛选了与细胞持续带毒有关的目标蛋白,不仅为简化猪瘟传代细胞苗生产工艺提供条件,也为研究STC细胞持续携带CSFV稳定传代的机制奠定基础.

关键词：猪瘟病毒C株、稳定细胞株、高滴度带毒、蛋白表达差异

所属期刊栏目：37

分类号：S852.65+1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目;题目:牛羊疫苗新型佐剂及工艺研究;国家自然科学基金项目;题目:仿生矿化优化口蹄疫病毒样颗粒耐热抗逆性研究

在线出版日期：2021-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：648-657