柯萨奇病毒A6病毒样颗粒的制备及免疫原性初步研究

摘要：

手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD)是一种常见传染病,以婴幼儿发病为主,柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A6,CV-A6)是引起HFMD暴发的主要病原体,其疫苗开发有待深入的研究,而病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)是潜在安全的候选疫苗.为制备CV-A6 VLPs,并研究其免疫原性,本研究利用Bac-to-Bac昆虫细胞杆状病毒表达系统共表达P1和3CD蛋白,制备并纯化CV-A6 VLPs,应用间接免疫荧光试验(Indirect immunofluscent assay,IFA)、SDS-PAGE、Western Blot、透射电镜法等方法鉴定.以Al(OH)3为佐剂,三种不同剂量CV-A6 VLPs免疫BALB/c小鼠,采用微量中和试验法检测小鼠血清中和抗体滴度.结果显示,重组有P1和3CD的杆状病毒质粒转染Sf9细胞,可形成CV-A6类病毒颗粒,直径约为26nm.SDS-PAGE和Western Blot结果说明P1前体蛋白被3CD作用切割产生了VPO、VP1和VP3,CV-A6VLPs由这三个病毒结构蛋白构成.小鼠免疫实验结果显示,CV-A6 VLPs可以刺激产生较高水平抗CV-A6的特异性中和抗体,维持至少12周,并且抗体中和效价与免疫剂量和免疫次数呈正相关.本研究获得重组杆状病毒rBac-CV-A6-P1-3CD,并在Sf9细胞内成功表达CV-A6 VLPs,可以刺激小鼠产生较高水平和持久的体液免疫反应.

关键词：柯萨奇病毒A组6型(CV-A6)、病毒样颗粒(VLPs)、昆虫细胞杆状病毒表达系统

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分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖北省知识创新专项项目;湖北省技术创新专项重大项目;重大新药创制"科技重大专项;三峡大学人才专项经费项目

在线出版日期：2021-02-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1067-1074