北美洲流行汉坦病毒多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要：

为了建立牛轭湖病毒(Bayou virus,BAYV)、纽约病毒(New York virus,NYV)、厄尼诺洛峡谷病毒(El Moro Canyon virus,ELMCV)以及岛景病毒(Isla Vista virus,ISLAV)四种病毒快速筛查、诊断的核酸检测技术,本研究选用上述四种病毒的N蛋白基因作为靶标区域设计四组特异性引物探针,建立四重实时荧光定量RT-PCR检测方法.用四种病毒体外转录RNA进行灵敏度和重复性验证,并使用其他病毒细胞培养物及体外转录RNA进行特异性验证.结果 显示,四重实时荧光定量PCR扩增效率均可达到95％以上,四种病毒体外转录RNA灵敏度介于1～10拷贝/μL,与单重检测方法无明显差异,且与其他病毒无交叉反应.稳定性评价结果显示,批内、批间变异系数均在3％以内.本研究所建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于相关样本的诊断与筛查.

关键词：四重实时荧光定量RT-PCR、牛轭湖病毒(BAYV)、纽约病毒(NYV)、厄尼诺洛峡谷病毒(ELMCV)、岛景病毒(ISLAV)

所属期刊栏目：36

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技重大专项2018ZX10711-001

在线出版日期：2020-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：617-623