10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003723
寨卡病毒RNA恒温快速扩增检测方法的建立
2015年以来,寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)感染被报告和小头症之间存有关联,已有多个国家和地区报告ZIKV感染证据,我国持续面对ZIKV输入风险.为发展适用于现场的快速高效的ZIKV核酸检测方法,选取ZIKVNS1片段保守区设计特异性引物探针,经优化建立了多种功能蛋白介导的ZIKV RNA恒温快速扩增检测方法.利用所制备的ZIKV NS1片段体外转录RNA作为参考品,并与实时荧光定量RT-PCR检测结果进行比较.同时利用ZIKV细胞培养物中加入健康人血清制备的模拟临床标本进行初步验证.结果 显示,建立的RNA恒温快速扩增检测方法可100%检出100拷贝/μL体外转录RNA,可在15 min以内判读,大大低于PCR的常规检测时间;用该方法检测其他相关病毒,无交叉反应.病毒滴度在(104~107 PFU/mL)之间的模拟临床病人标本可达到100%检出.本研究建立的ZIKV RNA恒温扩增快速检测方法快速、灵敏、特异,适用于ZIKV现场应急检测,为ZIKV的防控提供了重要的技术支撑.
寨卡病毒(ZIKV)、RNA恒温快速扩增、核酸检测
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R373.1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家科技重大专项2018ZX10711001
2020-08-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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