慢性蜜蜂麻痹病毒SP1蛋白的原核表达及免疫原性分析

摘要：

慢性蜜蜂麻痹病毒(Chronic bee paralysis virus,CBPV)主要侵袭成年工蜂,造成患病蜜蜂神经麻痹,丧失飞行能力,出现爬行现象.CBPV据推测有两个结构蛋白SP1和SP2,通过对SP1蛋白的免疫原性探索,为SP1蛋白的功能研究和CBPV生物制剂研制奠定基础.本研究根据大肠杆菌密码子的偏嗜性,对CBPVSP1基因进行优化和合成,将其克隆至原核表达载体pET-32a,获得重组表达质粒pET-Opti-SP1.将重组质粒转化至宿主菌BL21(DE3)中诱导表达,用SDS-PAGE和Western Blot方法对该蛋白进行分析和鉴定,然后对最佳表达条件进行摸索.在此基础上,用纯化后的SP1蛋白免疫接种BALB/c小鼠,同时设置纯化病毒组、pET-32a对照组和空白对照组,检测免疫小鼠的淋巴细胞增殖指数(SI)和血清中抗体水平.结果 表明,首次成功表达和纯化了重组SP1蛋白,且该蛋白能诱导产生特异性抗CBPV的抗体,促进淋巴细胞的增殖和提高IL-4、IL-10、IFN-γ水平,具有较好的免疫原性.本研究为进一步研究CBPV SP1蛋白的功能和防治CBPV生物制剂的研发提供了帮助.

关键词：慢性蜜蜂麻痹病毒(CBPV)、慢性蜜蜂麻痹病(CBPD)、结构蛋白、原核表达、免疫原性

所属期刊栏目：35

分类号：S852.65;S895;Q966(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;辽宁省自然科学基金

在线出版日期：2019-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：473-478