荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

摘要：

抗狂犬病病毒(Rabies virus,RABV)核蛋白荧光抗体具有价格昂贵、保质期短和购买周期长等缺点,非常不利于各级疾病预防控制系统对该试剂的紧急使用.作为国家狂犬病实验室,亟需研发具有自主知识产权的异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记抗RABV核蛋白单克隆抗体(Monoclonal antibody,MAb),并且商品化,使其广泛应用于流行病学调查和实验室的病原学和血清学诊断,实现国家狂犬病监测和检测相关试剂的标准化,从而为我国狂犬病防控提供技术支持.制备FITC标记的抗RABV核蛋白MAb,并将其初步应用于直接免疫荧光实验(Direct fluorescent assay,DFA)和快速荧光灶抑制试验(Rapid fluorescent focus inhibition test,RFFIT).将本实验室制备的抗RABV核蛋白MAb 3B12进行FITC标记,通过DFA确定荧光标记抗体(FITC-3B12)工作浓度,以市售FITC标记MAb作为阳性对照,对狂犬病相关临床样本进行DFA和RFFIT检测.DFA实验结果显示,FITC-3B12的工作浓度为1∶80,与市售荧光抗体的检测结果符合率为100％.RFFIT结果显示,FITC-3B12与市售荧光抗体的检测结果无统计学差异,且具有良好的重复性(CV＜15％).以上结果表明,本实验室所制备的抗RABV核蛋白荧光抗体可应用于狂犬病相关的DFA及RFFIT检测.

关键词：狂犬病、狂犬病病毒(RABV)、异硫氰酸荧光素(FITC)、单克隆抗体(MAb)、直接免疫荧光实验(DFA)、快速荧光灶抑制试验(RFFIT)

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分类号：R511;R373.9;R392(传染病)

资助基金：国家重点研发项目2017YFC1200503;题目:畜禽四大症侯群病原鉴定技术体系与应急响应机制研究;传染病重大专项2017ZX10104001-004-001;题目:基于宏基因组学的病毒网络化监测和溯源技术体系研究;国家科技重大专项2018ZX10201002;题目:基于海量多元大数据的突发急性传染病时空多尺度预测预警模型与应用示范的构建;“一带一路”重要传染病流行规律和预警应对技术研究:重要传染病实验室保障技术研究2018ZX10101002-005

在线出版日期：2019-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：372-376