10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003517
蜜蜂残翼病毒VP2基因密码子优化、原核表达及免疫原性分析
蜜蜂残翼病毒(Deformed wing virus,DWV)是引发世界各地大范围蜂群损失的主要嫌疑对象,间接给农业生产带来了巨大的经济损失.为了探究DWV结构蛋白VP2的免疫原性,深入研究该蛋白的功能和为制备DWV单克隆抗体提供可靠的免疫原,本研究从DWV分离株(GenBank登录号:MF770715)扩增得到VP2基因,同时根据大肠杆菌密码子的偏嗜性对VP2基因进行优化并合成,分别将优化前和优化后的VP2基因克隆到pET-28a载体上,获得重组质粒pET-28a-VP2和pET-28a-opti-VP2,分别转化至宿主菌BL21 (DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot检测,显示仅优化后的opti-VP2基因高效表达,然后对最佳表达条件进行摸索.在此基础上,对重组蛋白纯化后分3次免疫6周龄的雌性BALB/c小鼠,同时设置纯化病毒组和空白对照组,对免疫小鼠的抗体水平和淋巴细胞增殖指数(SI)以及干扰素(IFN-γ)、白介素IL-2和IL-4水平进行检测.结果 表明,重组VP2蛋白能够诱导产生特异性抗体,促进淋巴细胞增殖,提高IFN-γ、IL-2和IL-4水平,具有良好的免疫原性,为深入研究DWVVP2蛋白功能和开发防治DWV的生物制剂提供了帮助.
蜜蜂残翼病毒(DWV)、VP2基因、优化、原核表达、免疫原性
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S855.3;S895.1(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金;辽宁省科技厅自然基金项目;锦州医科大学大学生创新创业项目
2019-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
255-263
