10.13242/j.cnki.bingduxuebao.003526
SMB-S15细胞中朊病毒PMCA方法的建立及对白藜芦醇抗朊病毒作用的评价
朊病毒是一类能引起人或动物神经退行性疾病的感染因子.蛋白质错误折叠循环扩增(Protein misfolding cyclic amplification,PMCA)是一种常见的朊病毒体外扩增技术.白藜芦醇是一种具有较高研究价值的植物抗菌素.为了建立SMB-S15细胞中朊病毒的PMCA体系,并探索PMCA技术在评价白藜芦醇抗朊病毒作用的意义,本研究以朊病毒感染细胞系SMB-S15细胞匀浆为种子,健康小鼠脑组织匀浆为底物,建立PMCA技术平台.将不同浓度的白藜芦醇导入PMCA体系,通过Western Blot方法检测PMCA产物中异常朊蛋白(PrPSc)的生成和变化.结果 显示:SMB-S 15细胞中PrPSc可以在建立的PMCA体系有效地复制.新生成的PrPSc分子的糖基化特征与原始细胞中的PrPSc不同,其双糖基化分子比例明显增加.同时也有别于羊瘙痒因子139A和ME7感染小鼠脑组织中的PrPSc分子.加入白藜芦醇后,PrPSc在PMCA体系中的复制明显被抑制,呈现出剂量依赖效应,其EC50约为4.616 μM.这些结果表明:SMB-S15细胞中的PrPSc可以通过PMCA大量扩增,建立的PMCA技术可有效地反映白藜芦醇对PrPSc在体外复制的抑制作用.
朊病毒病、朊病毒、SMB-S15细胞、蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)、异常朊蛋白(PrPSc)、白藜芦醇
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R373.9;R392;R511(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金
2019-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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183-188