单纯疱疹病毒Ⅰ型新开放读码框UL57的鉴定

摘要：

单纯疱疹病毒1型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)潜伏感染期间LATs的活跃转录可能与其启动子与增强子两侧的CTCF结合序列有关.本研究对位于UL56下游与LAT启动子上游之间并与CTCF结合序列重叠存在的一个新开放读码框(本研究中命名为UL57)进行了鉴定.首先利用HSV-1(F)细菌人工染色体(HSV-BAC)系统构建重组病毒HSV-EGFP-UL57,将EGFP序列插入UL57 5’端;然后分别通过Northern Blot和Western Blot检测EGFP标记的UL57的转录和表达;同时构建敲除UL57的重组病毒HSV-AUL57,观察UL57对病毒增殖的影响.结果显示,重组病毒HSV-EGFP-UL57感染HEp-2细胞17h后,EGFP探针检测到两条转录产物,其中1.8kb转录产物与预测大小相符;使用放线菌酮(Cycloheximide,CHX)阻断病毒即刻早期蛋白/早期蛋白合成后,UL57转录受到明显抑制.重组病毒HSV-EGFP-UL57感染Vero细胞后,9h可见融合蛋白表达,24h表达明显;融合蛋白分子量与预测大小(58kD)一致.病毒生长曲线显示,重组病毒HSV-EGFP-UL57及HSV-△UL57在Vero细胞中的增殖水平与HSV-1(F)基本一致.本研究表明,在HSV-1基因组(GenBank:GU734771.1) UL56下游与LAT启动子上游之间存在一个新开放读码框UL57(116 921bp～117 799bp),UL57可以进行转录,且其转录受病毒即刻早期蛋白/早期蛋白调控;转录产物可以翻译出融合蛋白,但表达水平较低.删除UL57对病毒增殖无明显影响.

关键词：单纯疱疹、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、UL57、开放读码框、基因转录、基因表达

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分类号：R373.9;R511(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广州市属高校科研项目1201620304;题目:HSV-1潜伏感染期ATF3的表达及其在病毒潜伏/激活中的机制研究

在线出版日期：2019-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：51-57