鲤浮肿病毒和锦鲤疱疹病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立
为了建立可同时检测鲤浮肿病毒(Carp edema virus,CEV)和锦鲤疱疹病毒(Kio herpesvirus,KHV)的检测方法,本研究根据CEV P4a基因保守序列,对英国环境、渔业水产养殖研究中心(Center for Environment,Fisheries and Aquaculture Science,CEFAS)设计合成的引物序列进行优化,合成1对特异性引物和1条用FAM荧光基团标记的TaqMan探针;根据KHV ORF7基因保守序列,设计筛选1对特异性引物和1条用VIC荧光基团标记的Taq-Man探针.优化反应条件,建立了CEV和KHV双重实时荧光定量PCR检测方法.结果显示该方法特异性强,与其它水生动物病毒无交叉反应;灵敏度高,对CEV和KHV的检测限均为15拷贝数/μL;组内重复与组间重复的平均变异系数小于3%.本研究建立的方法具有快速、特异、敏感等优点,可用于CEV和KHV的快速检测.
鲤浮肿病毒(CEV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、双重实时荧光定量PCR
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S941.41;R155.5(水产保护学)
北京市农业局科技新星计划项目20180212;题目:KHV和CEV双重PCR建立及应用;北京市创新团队BAIC03-2018;题目:北京市观赏鱼产业创新团队
2019-01-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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