基于RT-HDA等温扩增技术快捷检测H7N9禽流感病毒的方法研究
常规PCR方法不适宜于实验条件不足的基层现场检测H7N9禽流感病毒,不利于疑似病例的及时诊治.本研究旨在建立一种快速简便、高灵敏度、低成本的H7N9禽流感病毒快速核酸检测技术.选用H7N9禽流感病毒血凝素(Hemagglutinin,HA)基因作为靶标区域设计引物,采用FITC和Biotin标记上下游引物,通过逆转录解旋酶依赖性等温扩增(Reverse transcription helicase-dependent isothermal amplification,RT-HDA)技术扩增病毒RNA,辅以胶体金免疫层析试纸检测核酸扩增产物,建立H7N9禽流感病毒等温扩增检测方法.采用H7N9禽流感病毒质粒和病毒培养物对该方法的灵敏性、特异性和重复性进行评价,结果显示:病毒最低检测限20个拷贝数/μL,与常规PCR方法相比较无明显差异,重复性试验一致,与其他型别的禽流感、流感病毒无交叉反应.本研究建立的RT-HDA联合胶体金免疫层析试纸检测H7N9禽病毒检测方法具有较好的灵敏度、特异性和重复性,特别适用于现场条件下检测H7N9禽流感病毒快速简便的检测.
H7N9禽流感病毒、逆转录解旋酶依赖性等温扩增(RT-HDA)、胶体金免疫层析法
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R373.1(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
湖北省卫计委疾控及医药院校科研专项WJ2016J-003;题目:基于RT-HDA等温扩增技术的人禽流感H7N9现场快速检测方法研究;国家重点研发计划项目2016YFC1201404;题目:系列汽化过氧化氢与智能化紫外线消毒设备的研发与应用
2018-11-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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