蝙蝠体表蛛蝇中肯科伊病毒的分离鉴定
为调查云南省蝙蝠体表寄生虫蛛蝇中病原体的携带情况.采集蝙蝠体表蛛蝇标本,用细胞培养法分离病毒,对阳性分离物进行分子生物学鉴定,用RT-PCR(Reverse transcription PCR)、TCID50 (Tissue culture infective dose)、免疫荧光等实验对病毒的特性进行研究.2012年从勐腊县的棕果蝠(Rousettus leschenaulti)体表采集蛛蝇183只,利用节肢动物线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ(COⅠ)的通用引物用PCR方法鉴定为蛛蝇科的Eucam psi poda sundaica.从这些蛛蝇中分离到1株阳性分离物MLBC1215,能引起金黄地鼠肾细胞(Golden hamster kidney cell,BHK 21)和非洲绿猴肾细胞(African green monkey kidney cell,VeroE6)出现圆缩、脱落的细胞病变(Cytopathic effect,CPE).用RT-PCR方法扩增序列,测序结果显示MLBC1215病毒株为三节段RNA病毒,各基因组编码区序列长度分别为S基因为975核苷酸,M基因为4 568核苷酸,L基因为6 866核苷酸,3个基因节段核苷酸序列所形成的进化树拓扑构图相似,MLBC1215病毒株的S、M和L基因均与1970年泰国分离的肯科伊病毒(Kaeng Khoi orthobunyavirus,KKV)(PSC-19)处于同一进化分支.MLBC1215株的S、M、L片段与泰国PSC 19株的核苷酸的同源性分别为97.9％、94.4％和95.3％;氨基酸的同源性分别为98.7％、96.5％和98.4％.MLBC1215株在BHK-21细胞生长到60h达到最高滴度,TCID50为104.8/0.1ml,随后病毒滴度逐渐下降,至144h TCID50为10 3.6/0.1ml.MLBC1215株对小白鼠的主要器官均能引起病理改变,从而导致小白鼠发病死亡.采集的33份人血清中有9份IgG抗体与MLBC1215株有反应,检测结果为阳性,抗体滴度为4份1∶20,4份1∶40,1份1∶80.本次研究证实云南省腊勐县蝙蝠体表吸血昆虫蛛蝇携带布尼亚病毒目KKV.
肯科伊病毒(KKV)、蛛蝇、勐腊
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R373.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金;云南省应用基础研究计划
2018-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
461-470
