猪繁殖与呼吸综合征病毒和盖他病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用
盖他病毒(Getah virus,GETV)可感染猪并引起和猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)相类似的临床表现,且两者可混合感染而难以区分.我国检测PRRSV和其他诸多病毒的多重PCR文献已比比皆是,但尚无同时检测PRRSV和GETV方法的报道.为此,作者根据GenBank中公布的PRRSV和GETV全基因序列,设计了两对分别扩增PRRSV ORF7基因和GETV Cap基因片段的引物,通过反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,首次建立了可同时检测PRRSV和GETV的双重RT-PCR方法.结果显示,该方法可以同时扩增出PRRSV 633 bp和GETV 316 bp的特异性片段,而对猪瘟病毒等其他相关病毒扩增结果均为阴性.对GETV和PRRSV的cDNA最低检测量分别为2.48×10-4ng和2.50×10-5 ng.用建立的双重RT-PCR方法对河南15个地市92个猪场的136份临床疑似PRRS发病猪样品进行检测,共从58个猪场检出PRRSV单一阳性样品44份,阳性率为3 2.4％;GETV单一阳性样品7份,阳性率为5.15％;GETV和PRRSV混合感染样品8份,阳性率为5.88％.检测结果与单一RT-PCR结果吻合率达100％.该方法为GETV和PRRSV的快速检测、鉴别诊断和分子流行病学研究等提供了新的技术手段.
猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)、盖他病毒(GETV)、双重RT-PCR
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S855.3(动物医学（兽医学）)
河南省高校科技创新团队与支持计划资助项目14IRTSHN015;题目:动物疫病防控新技术
2018-05-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
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