人肠道病毒D68型微复制子的建立
建立人肠道病毒D68型(EV-D68)微复制子体系.利用增强绿色荧光蛋白(EGFP)或萤火虫荧光素酶(FLuc)报告基因替换病毒编码区,通过酶切连接,构建EV-D68 T7和Pol Ⅰ系统微复制子体系,获得重组质粒pT7-miniEGFP、pT7-miniFLuc、pH H21-miniEGFP、pHH21 miniFLuc和pH H21-miniFLucap.lyC.微复制子转染RD细胞,48h后荧光显微镜观察EGFP表达情况或用双报告系统检测荧光素酶表达水平.T7和Pol Ⅰ系统微复制子均可表达报告基因,但Pol Ⅰ系统荧光素酶表达水平是T7系统的5倍.并且病毒非编码区的PolyC区域对于病毒蛋白的表达起着重要的作用.本研究成功构建了EV-D68微复制子体系,为EV-D68非编码区功能研究提供工具.
人肠道病毒D68型(EV-D68)、反向遗传学、微复制子、RNA聚合酶Ⅰ、报告基因
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R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家重点研发计划2017YFA0205102;题目:病毒特异性分子靶标的筛选与纳米标记;天津大学自主基金2014XRX-0026;题目:病毒与免疫
2018-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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