寨卡病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒三重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价

摘要：

本研究旨在建立寨卡病毒(ZIKV virus,ZIKV)、登革病毒(Dengue virus,DENV)以及基孔肯雅病毒(Chikungunya virus,CHIKV)三种病毒快速筛查、诊断的核酸检测技术.选用ZIKV的NS1基因、DENV的NS5蛋白基因以及CHIKV的E1蛋白基因作为靶标区域设计三组特异性引物探针,建立三重实时荧光定量RT-PCR检测方法.用ZIKV、DENV、CHIKV病毒体外转录RNA和病毒细胞培养物对该方法的灵敏性、特异性、重复性等方面进行评价,最后临床样本以及模拟标本验证.结果显示:三重实时荧光定量RT-PCR检测方法扩增效率均可达到90％以上,三种病毒体外转录RNA最低检测限均低于15拷贝/PCR,病毒培养物最低检出限均低于10PFU/mL且与单重检测方法无明显差异.与其他病毒无交叉反应,变异系数均在2％以内.临床标本及模拟标本检出率均可达95％以上.本研究建立的检测寨卡病毒、登革病毒以及基孔肯雅病毒的三重实时荧光RT-PCR方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于寨卡病毒病等相关临床标本的检测.

关键词：三重实时荧光定量RT-PCR、寨卡病毒(ZIKV)、登革病毒(DENV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)

所属期刊栏目：34

分类号：R392

资助基金：科技改革发展专项国科发资”2016”273号;题目:寨卡疫情防控科技攻关应急专项 The present work was supported by Reform and development of the ministry of science and technology

在线出版日期：2018-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：52-58