中华蜜蜂囊状幼虫病病毒单克隆抗体的制备与鉴定
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中华蜜蜂囊状幼虫病病毒单克隆抗体的制备与鉴定

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为了制备中华蜜蜂囊状幼虫病病毒(CSBV)单克隆抗体,本实验利用纯化的中华蜜蜂囊状幼虫病毒(CSBV)免疫Balb/c小鼠,经过3次免疫后,小鼠断尾采血测其血清效价,选择效价高于l∶80 000的小鼠,在细胞融合前3~4d再加强免疫一次.取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行3次亚克隆后注射入Balb/c小鼠(Mus musculus)腹腔制备单抗腹水.共获得9株稳定分泌抗CSBV的单克隆抗体,命名为10A1、5B10、5A5、5H2、11D7、9A5、1D3、3C10、10C4,效价都在1∶16 000以上,经间接ELISA实验检测表明,具有较好的特异性.在此基础上,将9株腹水单抗分别与CSBV互作后,接种于2~3日龄中华蜜蜂幼虫,观察幼虫死亡率,研究单克隆抗体中和CSBV病毒能力,结果表明筛选到三株单克隆抗体(l0A1、5A5、9A5)对CSBV有中和作用,为CSBV的防治研究奠定了基础.

中华蜜蜂囊状幼虫病毒(CSBV)、杂交瘤细胞、单克隆抗体(McAb)

33

S895.1+33;Q78(养蜂、益虫饲养)

国家自然科学基金项目31372435;题目:中蜂囊状幼虫病毒培养体系建立及其受体与受体结合蛋白筛选;辽宁省高等学校优秀科技人才支持计划LR2015038;题目:中蜂囊状幼虫病毒优势抗原表位筛选及其与宿主互作蛋白;National Natural Science Foundation of China31372435:”Establishment of a culture system of larvae and their receptors and receptor-binding proteins”;Excellent Talents Supporting Program of Higher Education in Liaoning ProvinceLR2015038:”creening of Dominant Antigen Epitopes of the Honeycomb Venom Virus and Its Interactions with the Host”

2017-12-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

914-919

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病毒学报

1000-8721

11-1865/R

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2017,33(6)

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