基于微滴式数字PCR技术的甲型流感病毒绝对定量方法的建立及应用

摘要：

数字PCR(Digital PCR,dPCR)是核酸绝对定量的新方法,然而,基于dPCR的甲型流感病毒(Influenza A virus,FluA)绝对定量方法还未系统建立.本研究首先对微滴式dPCR的退火温度进行了梯度优化,确定了dPCR反应的最佳退火温度为64.4℃;利用FluA核酸标准品,确定了微滴式dPCR对FluA的检测范围为37.7～8.22×104拷贝/μL,检测的检出限为3.77拷贝/反应.微滴式dPCR的检测结果与标准品拷贝数的相关系数为e2=0.9988,提示该方法检测结果具有较高的可信度.用建立好的微滴式dPCR方法可对待测临床样本中的FluA进行了拷贝数定量.因此本研究建立了基于微滴式dPCR的FluA绝对定量方法,可有效地对临床样本中甲型流感病毒载量进行绝对定量,为临床研究中病毒载量的测定提供了一种技术.

关键词：数字PCR、甲型流感病毒、绝对定量

所属期刊栏目：33

分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：北京市科技计划项目项目号:D151100002115003,题目:各级综合医院病毒性肺炎筛查检测技术研究;国家科技支撑计划项目号:2015BA/12B11,题目:病毒性肺炎诊治和网络建设.

在线出版日期：2017-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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