埃博拉病毒重组膜蛋白Gp-Fc表达及免疫原性研究

摘要：

本研究利用HEK293F细胞表达了埃博拉病毒重组膜蛋白,并通过免疫小鼠初步研究了其免疫原性.按照人密码子使用频度优化编码埃博拉病毒膜蛋白胞外区基因,合成后将其插入到真核表达载体pXG-Fc中,构建埃博拉病毒糖蛋白和人IgG Fc片段融合蛋白表达质粒pXG-modGP-Fc.利用瞬时转染技术,将融合蛋白表达质粒转染到高密度培养的悬浮HEK293F细胞中,实现了分泌表达.通过Protein A亲和层析,得到了纯化的重组蛋白.将纯化的融合蛋白免疫小鼠,并通过间接ELISA对小鼠抗体效价进行评价.蛋白纯化及分析结果表明,本研究构建的真核表达系统能够有效表达埃博拉重组蛋白GP-Fe,细胞培养上清中重组蛋白以二聚体形式存在.通过间接ELISA分析,纯化的重组蛋白免疫实验动物后,可以在血清中检出高滴度的抗原特异性IgG,显示该重组蛋白具有良好的免疫原性.通过该研究,我们得到了具有良好免疫原性的重组蛋白,同时,该工作为研制基于重组蛋白的埃博拉疫苗以及筛选单克隆抗体打下基础.

关键词：埃博拉病毒、疫苗、糖蛋白、免疫原性

所属期刊栏目：32

分类号：R373.3+2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项;埃博拉出血热防控应急研究

在线出版日期：2016-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：8-13