鸭圆环病毒Cap基因酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
为构建鸭圆环病毒Cap基因酵母双杂交诱饵载体,以本实验室分离鉴定的DuCV GH01株Cap基因为棋板,对其进行酵母密码子优化后,连接到pGBKT7载体上构建诱饵质粒,经菌落PCR、酶切鉴定以及测序后,转化酵母菌株Y2HGold感受态,检测诱饵蛋白表达以及诱饵蛋白对酵母细胞毒性和白激活现象.结果表明,优化后的Cap基因全长774 bp,成功连接到诱饵载体pGBKT7中,重组质粒pGBKT7-Cap转入酵母细胞后,Western blot检测到50kD左右的蛋白条带,诱饵蛋白对酵母细胞既无毒性,又没有自激活现象.为进一步利用酵母双杂交技术筛选与Cap蛋白互作的蛋白奠定了基础.
鸭圆环病毒、Cap基因、酵母双杂交、诱饵载体
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S852.65(动物医学(兽医学))
高等学校博士学科点专项科研基金;四川省科技厅项目;四川省教育厅项目
2015-07-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
282-286