抗发热伴血小板减少综合征病毒结构蛋白单克隆抗体的制备和功能分析
为制备抗发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)结构蛋白的单克隆抗体,本研究用灭活纯化的SFTSV病毒颗粒免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得分别分泌抗糖蛋白单抗和核蛋白单抗的杂交瘤细胞株.用免疫荧光法和免疫沉淀方法对制备的单克隆抗体的抗原特异性进行鉴定,并初步进行单抗效价、中和活性及亲和力等功能分析.结果显示,通过细胞融合和克隆化,共筛选出13株稳定分泌抗糖蛋白(Glycoprotein,GP)单抗和7株稳定分泌抗核蛋白(Nucleoprotein,NP)单抗的杂交瘤细胞株.免疫荧光和免疫沉淀鉴定显示获得的单抗有良好的抗原特异性.抗GP单抗中6株针对Gn,7株针对Gc,大部分的间接免疫荧光(Indirect immunofluorescence assay,IFA)滴度在1 280~20 480之间,其中4株抗Gn单抗具有中和活性.获得的7株抗NP单抗均与NP特异性结合,IFA滴度范围在5 120~20 480,均无中和活性.此外,经非竞争ELISA检测的两株抗GP单抗(1C8和1G8)均有较高亲和力.本研究为SFTS诊断方法的发展及SFTSV致病机制研究奠定了基础.
发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)、核蛋白(NP)、糖蛋白(GP)、单克隆抗体
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R373.3+2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
“重大新药创制”科技重大专项:发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒灭活疫苗的研制2013ZX09102029;国家自然科学基金:SFTS布尼亚病毒转录调控元件的鉴定及功能研究31270201
2015-04-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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