基于病毒样颗粒的检测基孔肯雅病毒IgM抗体的MacELISA方法的建立与评价

摘要：

为了建立捕获法ELISA检测基孔肯雅病毒IgM抗体的方法,本研究分离基孔肯雅病毒结构蛋白编码基因C-E3-E2-6K-E1基因元件,通过昆虫细胞杆状病毒表达体系,制备病毒样颗粒,免疫昆明鼠制备多克隆抗体,纯化后用辣根过氧化物酶标记,建立一种以羊抗人IgM抗体、VLPs抗原和酶标多克隆抗体为基础的MacELISA检测基孔肯雅病毒IgM抗体的方法,通过商业化质控血清,实验室确诊基孔肯雅热、肾综合症出血热患者和健康人群血清标本对所建立方法进行优化和初步评价,并与德国欧蒙公司商业化CHIKV IgM抗体检测试剂盒IIFA-IgM进行比较研究.所建立方法特异性为99％(99/100),重复性检测板内变异性系数低于10％,板间变异系数低于15％,检测限明显低于IIFA-IgM商业化试剂盒(P＜0.0001).结果显示,本方法属常规ELISA方法,操作简单,具有较高的敏感性、特异性,可用于基孔肯雅病毒IgM抗体实验室检测,为该病的诊断和流行病学调查提供新的手段.

关键词：基孔肯雅病毒、病毒样颗粒、抗体IgM、MacELISA

所属期刊栏目：30

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：传染病防治重大专项2013ZX10004101,2011ZX10004-803-006

在线出版日期：2014-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：599-604