双重荧光定量一步RT-PCR法同时检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒

摘要：

建立一种可同时检测诺如病毒GⅠ和GⅡ型的双重荧光定量一步法RT-PCR方法.应用针对GⅠ型和GⅡ型诺如病毒的特异性引物以及Taqman探针,优化反应体系及条件,建立双重荧光定量一步法RT-PCR方法.对该方法的灵敏度、特异性、重复性进行评估,并对粪便标本进行检测,以传统RT-PCR方法作为参考评价此方法.结果表明,该方法特异性强,与肠道腺病毒、轮状病毒、星状病毒均无交叉反应,对GⅠ和GⅡ型诺如病毒核酸的最低检出限分别可达103拷贝/μL,具有很好的重复性.对100份粪便标本进行检测,诺如病毒的阳性率为31％,其中GⅠ型为3％,GⅡ型为28％,而传统RT-PCR法的检出率为22％.本文建立的双重荧光定量一步RT-PCR法能同时对GⅠ和GⅡ型诺如病毒进行快速检测,其灵敏度高、特异性好,可应用于胃肠炎病人中检测诺如病毒.

关键词：诺如病毒、双重荧光定量、一步法、RT-PCR、GⅠ型、GⅡ型

所属期刊栏目：29

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目81000727;国家科技重大专项2012ZX10004215

在线出版日期：2013-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：310-315