SARS冠状病毒S蛋白噬菌体抗原库的构建及筛选

摘要：

本研究旨在构建SARS冠状病毒S蛋白特异性噬菌体抗原库,并用于鉴定抗S蛋白单克隆抗体的抗原表位.首先采用PCR技术扩增出SARS冠状病毒S蛋白的全基因,以DNaseI将其随机酶切成50～500 bp不同大小的DNA片段.然后将DNA片段平末端化并连接到经过改造的噬菌体表达载体pComb3XSS,经电转化大肠杆菌XL1-Blue和辅助噬菌体感染获得S蛋白的特异性噬菌体抗原库.利用两个抗S蛋白单克隆中和抗体(S-M1和S-M2)对S蛋白抗原库进行富集和筛选.结果表明,我们成功构建库容量为5.7×106的S蛋白噬菌体抗原库.通过对S-M1和S-M2的有效富集和筛选,分别得到14个和15个阳性克隆,序列分析初步揭示了抗体的抗原表位.因此,S蛋白噬菌体抗原库的构建为鉴定S蛋白的抗原表位提供了重要的技术平台,对研发SARS疫苗和诊断试剂具有重要的科学意义和应用价值.

关键词：SARS冠状病毒、S蛋白、噬菌体抗原库、单克隆抗体、抗原表位

所属期刊栏目：29

分类号：R373.9(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家十二五艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项2012ZX10001-008;国家杰出青年基金81025009

在线出版日期：2013-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：280-286