同时鉴别6种鸡病毒性呼吸道病GeXP检测方法的建立

摘要：

为了建立一种能够同时鉴别H5、H7、H9亚型禽流感、新城疫、传染性支气管炎和传染性喉气管炎6种鸡病毒性呼吸道传染病病原体的GeXP检测方法,本研究根据这些病原体各自的基因保守序列,设计合成了7对特异性引物,优化反应条件,用单一病毒、混合病毒样品来验证所建立的GeXP方法的特异性和准确性,以不同拷贝数的克隆质粒来检测GeXP方法的灵敏度.检测34份临床阳性样品,进一步验证该法的可靠性.结果显示,在7对引物同时存在的GeXP反应体系中,可特异性地扩增出相关6种病毒目的片段,并可在102拷贝/μL水平同时特异地检测出鸡6种病毒性呼吸道传染病,GeXP方法检测34份临床阳性样品结果与病毒分离一致.本研究建立的GeXP方法不仅可高通量检测6种病原体,而且具有特异性强和灵敏度高的特点,适用于临床样品混合感染的快速鉴别诊断,对这6种发病特征及临床症状相似的鸡病毒性呼吸道病的有效防控有很高的实际应用价值.

关键词：GeXP检测、鸡呼吸道病、多重PCR

所属期刊栏目：29

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西特聘专家专项经费2011B020;广西科技攻关重大专项1222003-2-4;桂渔牧科09254-18

在线出版日期：2013-07-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：250-257