稳定表达流感病毒基质蛋白2的哺乳动物细胞系的建立

摘要：

本研究构建了稳定表达甲型流感病毒基质蛋白2(M2)的哺乳动物细胞系.应用PCR方法扩增A/PR/8/34(H1N1)株流感病毒M2基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA5/FRT(pDF)上,构建出pDF-M2重组质粒.将鉴定正确的pDF M2与表达Flp重组酶的pOG44质粒共转染Flp-In-CHO细胞,通过体内同源重组使目的基因整合到宿主细胞染色体上.筛选具有Hygromycin B抗性的重组细胞株命名为CHO-M2.以间接免疫荧光法(IFA)和Western blot法检测M2的表达,共获得15株高表达M2蛋白的重组细胞株.这些重组细胞株在连续培养10代后,PCR方法仍可检测到M2基因的存在,IFA也检测到蛋白的稳定表达.本研究成功获得了稳定表达甲型流感病毒M2的哺乳动物细胞系,为M2蛋白的功能研究和非复制型流感病毒疫苗的研制提供了新的工具.

关键词：基质蛋白2、流感病毒、哺乳动物细胞系

所属期刊栏目：29

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：传染病防治科技重大专项2009ZX10004-710

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：7-11