猪骨髓基质抗原2基因的克隆、表达及生物学活性研究

摘要：

研究目的是克隆猪骨髓基质抗原2 (Bonc marrow stromal antigen 2,BST- 2)基因并进行真核表达,获得具有抗病毒活性的重组BST-2蛋白.研究通过RT-PCR从猪瘟弱毒疫苗和聚肌胞(Poly Ⅰ:C)刺激的猪肾细胞(PK-15)中扩增出猪BST-2 cDNA,克隆至真核表达载体pcDNA3.1/V5-His,构建重组表达质粒pcDNA-BST-2,转染HEK293T细胞,纯化BST-2蛋白并经Bradford法定量,Western blot检测,研究BST-2抗病毒生物学活性.酶切鉴定和核酸序列测定证实pcDNA-BST-2真核表达质粒构建成功,转染HEK293T细胞后,经间接免疫荧光能够检测到绿色荧光.生物学活性测定重组BST-2蛋白具有一定的抗水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)、H9禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)及猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的活性.结果表明,重组BST-2具有一定抗病毒生物功能,为进一步研究重组BST 2蛋白的活性以及BST-2抗病毒药物研究奠定了基础.

关键词：猪骨髓基质抗原2、真核表达、生物活性、抗病毒活性

所属期刊栏目：28

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：重组猪干扰素诱导蛋白的开发与推广应用2009GG10009011

在线出版日期：2012-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：548-553