用rAAV8-1.3HBV制备两种品系小鼠乙型肝炎病毒感染模型的比较研究
我们先前用rAAV8-1.3 HBV静脉注射C57BL/6小鼠成功地制备了慢性乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染模型.为了探讨不同品系的小鼠对rAAV8-1.3HBV静脉注射是否具有不同反应,本研究比较了C57BL/6和BALB/c小鼠静脉注射重组病毒后外周血中HBV抗原和抗体水平、病毒载量和肝脏组织HBcAg表达情况,以及不同剂量重组病毒注射与这些指标的关系.将低(4×109 Viral genome,vg)、中(4×1010vg)和高(4×1011vg)三种剂量的rAAV8-1.3HBV通过尾静脉注射至C57BL/6和BALB/c小鼠,分别利用ELISA和荧光定量PCR方法检测血清中的HBV抗原、抗体水平以及HBV DNA,利用免疫组化检测肝脏组织HBcAg的表达.结果发现,对于C57BL/6小鼠,三种不同剂量rAAV8-1.3HBV注射均可造成100％小鼠出现HBV持续感染；血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA以及肝组织HBcAg稳定表达超过8个月,其表达水平随重组病毒注射剂量的增加而升高,高剂量注射时可造成超过40％的肝细胞感染HBV,血清中HBV DNA可达105 IU/mL以上；未检测到针对HBV的抗体.对于BALB/c小鼠,三种不同剂量rAAV8-1.3HBV注射也可造成100％小鼠出现HBV持续感染；血清HBeAg和HBV DNA以及肝组织HBcAg稳定表达超过8个月,但是血清HBsAg在重组病毒注射2周之后显著下降甚至消失；在中剂量注射组的BALB/c小鼠血清中检测到低水平的Anti-HBs;血清HBeAg和肝组织HBcAg的表达水平随重组病毒注射剂量的增加而增高,并且各剂量组表达水平均高于C57BL/6小鼠,高剂量注射时可造成超过50％的肝细胞感染HBV.本研究表明,低至4×109 vg剂量的rAAV8-1.3HBV注射即可造成C57BL/6和BALB/c两种品系小鼠出现HBV持续感染,并且HBV复制水平随重组病毒注射剂量增加而增高； BALB/c小鼠对HBV的免疫反应强于C57BL/6小鼠,可以产生针对HBsAg的体液免疫反应而使血清HBsAg转阴,但无法清除携带HBV的肝细胞.
动物模型、乙型肝炎病毒、重组8型腺相关病毒、小鼠品系
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Q78(基因工程（遗传工程）)
肝炎相关肝癌生物治疗新途径新制品的研究和应用;重大新药创制"科技重大专项
2012-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
541-547
